MP Biomedicals™ Kit de détection de sénescence FastCellular™, SPiDER-ΒGal

La sénescence cellulaire est un phénomène par lequel les cellules normales cessent de se diviser et entrent dans un état d’arrêt de croissance irréversible. C’est l’un des aspects les plus fondamentaux du comportement cellulaire et on pense généralement qu’il est associé à des mécanismes suppresseurs tumoraux et à une cause sous-jacente du vieillissement. La Β-galactosidase (SA-Β-gal) associée à la sénescence, qui est surexprimée dans les cellules sénescentes, a été largement utilisée comme marqueur de la sénescence cellulaire. Bien que X-gal soit un réactif bien connu utilisé pour détecter SA-Β-gal, X-gal présente les inconvénients suivants : 1) exigence de cellules fixes en raison d’une mauvaise perméabilité cellulaire, 2) faible capacité quantitative en raison de la difficulté à différencier visuellement les cellules colorées et non colorées 3) exigence pour de longues durées de coloration.

Pour venir à bout des inconvénients inhérents à l’utilisation de X-gal, nous utilisons un nouveau réactif et une nouvelle méthode pour la détection de la sénescence cellulaire. Spider-ΒGal offre une sensibilité accrue à la détection de SA-Β-gal en raison de l’augmentation de la perméabilité cellulaire et de la rétention à l’intérieur des cellules. Par rapport à la méthode X-gal, le kit de détection de sénescence FastCellular peut être utilisé pour les cellules vivantes et fixes, car nous fournissons de la bafilomycine A1 pour inhiber spécifiquement l’activité de la Β-galactosidase endogène dans les cellules vivantes et ainsi augmenter la spécificité de détection des cellules vivantes. Pour les cellules fixes, la SA-Β-gal est détectable à l’aide d’un tampon Spider-ΒGal et Mcllvaine (pH 6,0, veuillez consulter le protocole pour les dosages cellulaires fixes). Puisque Spider-ΒGal émet une fluorescence forte et stable après la réaction avec SA-Β-gal, elle peut être appliquée à l’analyse quantitative par cytométrie en flux. En outre, le temps de coloration est de seulement 30 minutes. Le kit comprend une plaque à 6 puits avec 1 unité de SPiDER-ΒGal et 1 unité de bafilomycine A1

Avantages de l’utilisation du kit de détection de sénescence FastCellular :

• Sensibilité accrue grâce à une nouvelle sonde de détection fluorogénique
• Applicable aux cellules vivantes et aux tissus fixes
• Capacité de quantifier la SA-Β-gal dans le dosage de sénescence cellulaire
• Temps de coloration court (30 min)